Belangrijkste verschil - flowcytometrie versus FACS

In de context van de celtheorie zijn cellen de fundamentele structurele en functionele eenheid van alle levende organismen. Celsortering is een methode die wordt gebruikt om verschillende cellen te scheiden op basis van de fysiologische en morfologische kenmerken. Ze kunnen intracellulaire of extracellulaire kenmerken hebben. Interactie van DNA, RNA en eiwitten worden beschouwd als intracellulaire interactieve eigenschappen, terwijl de vorm, grootte en verschillende oppervlakte-eiwitten worden beschouwd als extracellulaire eigenschappen. In de moderne wetenschap hebben celsorteringsmethoden ertoe bijgedragen dat het verschillende onderzoek in biologische studies en ook bij de vaststelling van nieuwe principes door middel van onderzoek naar geneeskunde werd ondersteund. Celsortering wordt uitgevoerd op verschillende methoden, waaronder primitief met minder apparatuur en geavanceerde technologische methoden met behulp van geavanceerde machines. Flowcytometrie, fluorescent geactiveerde celsortering (FACS), magnetische celselectie en enkele celsortering zijn de belangrijkste gebruikte methoden. Flowcytometrie en FACS zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren op basis van hun optische eigenschappen. FACS is een gespecialiseerd type flowcytometrie. Flowcytometrie is een methodologie die wordt gebruikt tijdens de analyse van een heterogene populatie cellen volgens verschillende celoppervlakmoleculen, grootte en volume waarmee afzonderlijke cellen kunnen worden onderzocht. FACS is een proces waarbij een monstermengsel van cellen wordt gesorteerd op basis van hun lichtverstrooiings- en fluorescentiekarakteristieken in twee of meer containers. Dit is het belangrijkste verschil tussen flowcytometrie en FACS.

INHOUD

1. Overzicht en belangrijkste verschil 2. Wat is flowcytometrie 3. Wat is FACS 4. Overeenkomsten tussen flowcytometrie en FACS 5. Zij aan zij vergelijking - Flowcytometrie versus FACS in tabelvorm 6. Samenvatting

Wat is flowcytometrie?

Flowcytometrie is een methode die wordt gebruikt om de expressie van intracellulaire moleculen en het celoppervlak te onderzoeken en te bepalen en om verschillende celtypen te definiëren en te karakteriseren. Het wordt ook gebruikt bij het bepalen van het celvolume en de celgrootte en om de zuiverheid van geïsoleerde subpopulaties te evalueren. Dit maakt de multi-parameterevaluatie van afzonderlijke cellen ongeveer tegelijkertijd mogelijk. Flowcytometrie wordt gebruikt bij het meten van de fluorescentie-intensiteit die wordt geproduceerd door fluorescent gemerkte antilichamen die helpen bij het identificeren van eiwitten of liganden die binden aan geassocieerde cellen.

Over het algemeen omvat flowcytometrie hoofdzakelijk drie subsystemen. Ze zijn de fluidics, de elektronica en de optica. In flowcytometrie zijn vijf hoofdcomponenten beschikbaar die worden gebruikt bij het sorteren van cellen. Ze zijn een stroomcel (een stroom vloeistof die wordt gebruikt om ze te transporteren en de cellen uit te lijnen voor een optisch detectieproces), een meetsysteem (kan verschillende systemen zijn, waaronder kwik- en xenonlampen, hoogvermogen watergekoeld of luchtgekoelde lasers met laag vermogen of diodelasers), een ADC; Analoog naar digitaal convertersysteem, versterkingssysteem en een computer voor analyse. De acquisitie is het proces waarbij de gegevens uit de monsters worden verzameld met behulp van flowcytometer. Dit proces wordt gemedieerd door een computer die is verbonden met de flowcytometer. De software die in de computer aanwezig is, analyseert de informatie die vanuit de flowcytometer naar de computer wordt gevoerd. De software heeft ook de mogelijkheid om parameters aan te passen van het experiment dat de flowcytometer bestuurt.

Wat is FACS?

In de context van Flowcytometrie is Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS) een methode die wordt gebruikt bij het differentiëren en sorteren van een monster van een mengsel van biologische cellen. De cellen zijn gescheiden van twee of meer containers. De sorteermethode is gebaseerd op de fysieke kenmerken van de cel, waaronder lichtverstrooiing en fluorescentie-eigenschappen van de cel. Dit is een belangrijke wetenschappelijke techniek, die kan worden gebruikt om betrouwbare kwantitatieve en kwalitatieve resultaten te verkrijgen van fluorescentiesignalen die worden uitgezonden door elke cel. Tijdens FACS, aanvankelijk, het vooraf verkregen mengsel van cellen; een suspensie wordt gericht naar het midden van een smalle stroom vloeistof die snel stroomt. De vloeistofstroom is ontworpen om de cellen in de suspensie te scheiden op basis van de diameter van elke cel. Een trillingsmechanisme wordt toegepast op de suspensiestroom die resulteert in de vorming van individuele druppels.

Het systeem is gekalibreerd om een ​​enkele druppel met één cel te maken. Vlak voor de vorming van druppeltjes beweegt de stromingssuspensie langs een fluorescentiemeetapparaat dat de fluorescentiekarakteristiek van elke cel detecteert. Op het punt waar druppeltjes worden gevormd, wordt een elektrische oplaadring geplaatst die voorafgaand aan de meting van de fluorescentie-intensiteit een lading in de ring induceert. Wanneer de druppeltjes eenmaal uit de suspensiestroom zijn gevormd, wordt een lading gevangen in de druppeltjes die vervolgens in een elektrostatisch afbuigsysteem komt. Afhankelijk van de lading leidt het systeem de druppels naar verschillende containers. De wijze waarop de heffing wordt toegepast, is afhankelijk van de verschillende systemen die in FACS worden gebruikt. De apparatuur die wordt gebruikt in FACS staat bekend als een fluorescentie-geactiveerde celsorteerder.

Wat is de overeenkomst tussen flowcytometrie en FACS?


  • Flowcytometrie en FACS zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren op basis van hun optische eigenschappen.

Wat is het verschil tussen flowcytometrie en FACS?

Samenvatting - Flowcytometrie versus FACS

De cel is de fundamentele structurele en functionele eenheid van alle levende organismen. Celsortering is het proces waarbij cellen worden geïsoleerd en gedifferentieerd in verschillende categorieën op basis van hun intracellulaire en extracellulaire eigenschappen. Flowcytometrie en FACS zijn twee belangrijke methoden bij het sorteren van cellen. Beide processen zijn ontwikkeld om cellen te differentiëren op basis van hun optische eigenschappen. Flowcytometrie is een methodologie die wordt gebruikt tijdens de analyse van een heterogene populatie cellen volgens verschillende celoppervlakmoleculen, grootte en volume waarmee afzonderlijke cellen kunnen worden onderzocht. FACS is een proces waarbij een monstermengsel van cellen wordt gesorteerd op basis van hun lichtverstrooiings- en fluorescentiekarakteristieken in twee of meer containers. Dit is het verschil tussen flowcytometrie en FACS.

Download de PDF-versie van Flow Cytometry versus FACS

U kunt de PDF-versie van dit artikel downloaden en voor offline doeleinden gebruiken volgens de citatienota. Download hier de PDF-versie Verschil tussen flowcytometrie en FACS

Referentie:

  1. Flowcytometrie (FCM) / FACS | Fluorescentie-geactiveerde celsortering (FACS). Geraadpleegd op 22 september 2017. Beschikbaar hier Ibrahim, Sherrif F. en Ger van den Engh. "Flowcytometrie en celsortering." SpringerLink, Springer, Berlijn, Heidelberg, 1 januari 1970.. Toegang gehad tot 22 september 2017. Hier beschikbaar

Afbeelding met dank aan:


  1. 'Cytometer'By Kierano - Eigen werk, (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia' Fluorescentie Assisted Cell Sorting (FACS) B'By SariSabban - Sabban, Sari (2011) Ontwikkeling van een in vitro modelsysteem voor het bestuderen van de interactie van Equus caballus IgE met zijn hoge affiniteit FcsR-receptor (proefschrift), The University of Sheffield, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia